鱟試驗是利用鱟的阿米巴細胞與微量?jì)榷舅禺a(chǎn)生凝集反應的現象,判斷樣品中細菌內毒素限量是否符合規定的一種方法。它具有比家兔法更簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、重現性好等優(yōu)點(diǎn)。但是該法受到許多因素的影響,故在做鱟試驗檢查時(shí),應注意下列問(wèn)題。
1 鱟試劑靈敏度
藥典規定每批鱟試劑在用于試驗前首先核對靈敏度。因為鱟試劑由于生產(chǎn)廠(chǎng)家不同,部分鱟試劑檢測同一檢品時(shí),用相同標示值的鱟試劑,出現不同結果。因而先核對靈敏度可避免因鱟試劑本身造成的判斷失誤。
2 操作條件
2.1 操作熟練程度
操作時(shí)應該將手用酒精消毒,安瓿開(kāi)啟前應先用砂石劃痕(不管是色點(diǎn)或包環(huán)易折安瓿),用手半拉半掰將頸部折斷,千萬(wàn)不能用鑷子敲擊,防止碎玻屑掉入安瓿。在鱟試劑的溶解、樣品的稀釋及加入時(shí),取樣均應準確,緩緩加入避免氣泡。雙手避免在安瓿或試管的上方來(lái)回移動(dòng),加樣后用封口膜迅速封閉管口,并立即放入恒溫水浴箱中,操作要快,否則易致假陽(yáng)性的出現。
2.2 溫度
溫度對鱟試劑的靈敏度影響很大,隨著(zhù)溫度的升高以及延長(cháng)保溫時(shí)間,鱟試劑的靈敏度亦增大,增加假陽(yáng)性。溫度過(guò)高會(huì )破壞鱟試劑。應控制在(37±1)℃之間,保溫(60±2)min。
2.3 試驗用的試管架最好專(zhuān)門(mén)定制,眼孔直徑應與安瓿或試管直徑相接近,左右晃動(dòng)。水浴箱要放置不要傾斜,保溫過(guò)程中不可隨時(shí)取出觀(guān)察。防止試管受到振動(dòng)鱟試劑與細菌內毒素形成的凝膠受到振動(dòng)后易變形而誤判為陰性。
3 其它
3.1 供試品稀釋
選用更高靈敏度的鱟試劑,則應增加樣品的稀釋倍數。
3.2 所用器皿均應徹底洗凈和滅菌安全
實(shí)驗用器皿均應充分洗滌并沖洗干凈,特別是接觸酸堿或用洗衣粉、洗液等洗滌后,更應沖洗干凈,以免殘留物破壞極微量的內毒素。